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小鼠凋亡相關(guān)因子配體ELISA試劑盒標(biāo)本的處理

來(lái)源: 上海博湖生物科技有限公司 >> 進(jìn)入該公司展臺(tái) 2023/05/25 10:24:21 已瀏覽:
導(dǎo)讀:小鼠凋亡相關(guān)因子配體ELISA試劑盒標(biāo)本的處理

ELISA的檢測(cè)目的是為了實(shí)驗(yàn)提供準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)依據(jù),為了保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性,在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中必須堅(jiān)持全面的質(zhì)量控制和全過(guò)程質(zhì)量控制,在收集標(biāo)本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃。

ELISA標(biāo)本的處理:

1、血清:室溫血液私人凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。

2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

3.尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成分時(shí),用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)仔細(xì)收集上清,檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成分時(shí),用PBSPH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右,通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成分。

5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量,加入一定量的PBS,PH7.4,用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?,?biāo)本融化后任然保持2-8°C的溫度,加入一定量的PBSPH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用,

6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行試驗(yàn),若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20°C保存,單應(yīng)避免反復(fù)凍融。

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