ELISA夾心法原理與步驟

來(lái)源：上海博湖生物科技有限公司 >> 進(jìn)入該公司展臺(tái) 2022/07/05 14:54:13 已瀏覽：次

導(dǎo)讀:ELISA夾心法原理與步驟

原理：針對(duì)抗原分子上2個(gè)不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標(biāo)抗體，將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標(biāo)抗原結(jié)合物。夾心法常用于檢測(cè)大分子抗原，一般的操作步驟為:

1. 將具有專一性的抗體固著（coating）于塑膠孔盤上，完成后洗去多余抗體；

2. 加入待測(cè)檢體，檢體中若含有待測(cè)的抗原，則其會(huì)與塑膠孔盤上的抗體進(jìn)行專一性鍵結(jié)；

3. 洗去多余待測(cè)檢體，加入另一種對(duì)抗原專一的一次抗體，與待測(cè)抗原進(jìn)行鍵結(jié)；

4. 洗去多余未鍵結(jié)一次抗體，加入帶有酶的二次抗體，與一次抗體鍵結(jié)；

5. 洗去多余未鍵結(jié)二次抗體，加入酶底物使酵素呈色，以肉眼或儀器讀取呈色結(jié)果。

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