PLC-PRF-5  細胞 ATCC來源 傳代細胞

我公司細胞庫中心的細胞，  母細胞是從美國ATCC細胞中心購買，  到國內(nèi)細胞庫后經(jīng)技術(shù)人員永生化處理， 并精心培養(yǎng)到第4代活力佳狀態(tài)的細胞株， 適合各類科研機構(gòu)使用 （ 是目前國內(nèi)高品質(zhì)的細胞株 ） 

細胞操作方法介紹：

以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考，具體操作還需要根據(jù)到貨時細胞密度，細胞生長狀態(tài)等具體情況，酌情處理，如需要更詳細技術(shù)指導，請及時或郵件聯(lián)系。

需要特別指出的是：如細胞出現(xiàn)問題，請于48h內(nèi)及時反饋，本公司將竭誠為您服務(wù)！

一．貼壁細胞

1. 客戶接收到細胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。

2. 肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X 200X 各一張）。

3. 顯微鏡觀察細胞，當細胞融匯至80%左右（可以傳代的情況下），細胞應該在37度培養(yǎng)箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度，培養(yǎng)瓶應預留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

4. 嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。

5. 將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。

6. 用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。 

7. 1000rpm5min離心，重懸細胞。換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃5%CO2  培養(yǎng)。

二．懸浮細胞

1. 接收到細胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。

2. 肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X 200X 各一張）。

3. 嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。

4. 將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴禁直接傾倒）。

5. 1000rpm5min離心，重懸細胞。 換新的細胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基，37℃5%CO2  培養(yǎng)。

三．一毫升小管操作方法  小管內(nèi)也是此細胞。

1. 用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）。

2. 嚴格無菌操作，用吸管吸出管中細胞至9ml完全培養(yǎng)基混勻。

3. 1000rpm5min離心，重懸細胞。

4.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃5%CO2  培養(yǎng)